細(xì)胞培養(yǎng)基是一種必不可少的液體培養(yǎng)基，用于支持和擴(kuò)展細(xì)胞在體外的生長(zhǎng)。合成培養(yǎng)基種類很多，常用的有十多種，目前使用最廣泛的是RPMI 1640，MEM，DMEM和DMEM/F12。
RPMI 1640 培養(yǎng)基：最初為培養(yǎng)小鼠白血病細(xì)胞的需要而制備。開始的配方適合懸浮細(xì)胞的生長(zhǎng)，主要針對(duì)淋巴細(xì)胞，后經(jīng)幾次改良從RPMI 1630,1634而至1640，其成分較為簡(jiǎn)單。現(xiàn)發(fā)現(xiàn)它適應(yīng)于多種類型細(xì)胞的生長(zhǎng)，包括腫瘤細(xì)胞以及很多正常組織細(xì)胞體外培養(yǎng)。
MEM 培養(yǎng)基：是最低必需培養(yǎng)基，主要是貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，修改配方后也可用于其他類型細(xì)胞培養(yǎng)，例如如無(wú)鈣（Ca）MEM培養(yǎng)基可被用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，而Hank’s平衡鹽的MEM培養(yǎng)基可被用于二倍體細(xì)胞的培養(yǎng)。
DMEM 培養(yǎng)基：DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時(shí)又分為高糖型（4500mg/L）和低糖型(1000mg/L)。而MEM中葡萄糖含量1000mg/L。低糖的酵母適合在7%以下的糖濃度中生存，而高糖的酵母適合在7%以上糖濃度中生存。DMEM-高糖型適合生長(zhǎng)較快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞，克隆細(xì)胞，也可用于DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)；高糖型使細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)快，不利于融合細(xì)胞的染色體穩(wěn)定，做單抗細(xì)胞融合時(shí)，一般使用低糖型，DMEM-低糖型主要用于干細(xì)胞的培養(yǎng)。
DMEM/F12(1：1) 培養(yǎng)基：DMEM培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分濃度較高，F12培養(yǎng)液成分復(fù)雜，含有多種微量元素。DMEM和F12以1：1結(jié)合，稱為DMEM/F12培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下細(xì)胞培養(yǎng)，常用于細(xì)胞的克隆生長(zhǎng)及干細(xì)胞培養(yǎng)。
Neurobasal：這是一種專為神經(jīng)細(xì)胞設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，適用于神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)。
培養(yǎng)基的顏色主要是酚紅來(lái)顯示的，酚紅指示顏色非常靈敏，p值范圍為6-8，顏色由黃變?yōu)樽霞t。酚紅不是必須的，在有些情況下甚至是多余的，酚紅有類似固醇類激素的作用，如果涉及到固醇類激素相關(guān)的細(xì)胞培養(yǎng)，最好不要添加。但是為了培養(yǎng)方便，能讓我們直觀地感覺培養(yǎng)液的狀況，加入酚紅后，如果培養(yǎng)液偏酸了，就顯示偏黃色，偏堿性了就顯示偏紫色。另外在做流式細(xì)胞的時(shí)候，酚紅會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，因此也不要添加。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，檢查培養(yǎng)液顏色和透明度變化，顏色變黃，說(shuō)明pH下降；變紅或紫紅色，說(shuō)明pH上升，細(xì)胞生長(zhǎng)停滯、死亡，一般生長(zhǎng)穩(wěn)定的細(xì)胞2-3天換液一次，生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞可3-4天換液一次。一旦新鮮的培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素，建議1周內(nèi)使用完。只有充分了解培養(yǎng)基，才能養(yǎng)好細(xì)胞！
